【四環素】

四環素類抗生素(Tetracyclines)是由放線菌產生的一類廣譜抗生素，包括金霉素（Chlotetracycline)、土霉素（Oxytetracycline）、四環素（Tetracycline）、及半合成衍生物甲烯土霉素、強力霉素、二甲胺四環素等，其結構均含并四苯基本骨架；廣泛用于多種細菌及立克次氏體、衣原體、支原體等所致之感染。四環素類抗生素在酸性和堿性條件下均不穩定，四環素類藥物中含有許多羥基、烯醇羥基及羰基，在中性條件下能與多種金屬離子形成不溶性螯合物。與鈣或鎂離子形成不溶性的鈣鹽或鎂鹽，與鐵離子形成紅色絡合物，與鋁離子形成黃色絡合物。在體內Tetracyclines藥物與鈣離子形成的絡合物呈黃色沉積在骨骼和牙齒上，小兒服用會發生牙齒變黃，孕婦服用后其產兒可能發生牙齒變色，骨骼生長抑制。因此小兒和孕婦對此藥因慎用或禁服。

關于國家標準中四環素的檢出限：

——動物源性食品中四環素（二甲胺四環素、土霉素、四環素、去甲基金霉素、金霉素、美他環素及多西環素）的檢出限——50μg/kg；

——化妝品中四環素的檢出限：

二甲胺四環素—25mg/kg  定量限：50mg/kg

土霉素、四環素、去甲基金霉素——10mg/kg  定量限：25mg/kg      

金霉素、美他環素、多西環素——5mg/kg     定量限：10mg/kg 

脫水四環素、差向脫水四環素——2.5mg/kg   定量限：5mg/kg 

——牛奶及奶粉中土霉素、四環素、金霉素、多西環素的檢出限：

牛奶中：土霉素、四環素——5μg/kg

        金霉素、多西環素——10μg/kg

奶粉中：土霉素、四環素——25μg/kg

        金霉素、多西環素——50μg/kg

本方案分離檢測的11種四環素類抗生素：二甲胺四環素（MINO）、土霉素（OTC）、四環素（TC）、差向四環素（ETC）、金霉素（CTC）、差向金霉素（MCTC )、脫水四環素（ATC）、差向脫水四環素（ETAC）、甲烯土霉素（MTC）、去甲基金霉素（DMCTC）、多西環素（DC）。

【樣品處理過程】

動物肝臟、腎臟、肌肉組織及水產品：稱取均勻式樣5g（精確到0.01g），置50mL聚丙烯離心管中，分別用20mL、20mL、10mL 0.1mol/L EDTA-Mcllvainc 緩沖溶液冰水浴超聲提取三次，每次漩渦混勻1min，超聲提取10min，3000r/min離心10min（溫度低于15℃），合并上清液（控制總提取液的體積不超過50mL），定容至50mL，混勻，5000r/min離心10min（溫度低于15℃），用快速濾紙過濾，待凈化。

凈化：準確吸取10mL提取液（相當于1g樣品）以1滴/s的速度過HLB固相萃取柱，待樣液完全流出后，依次用5mL水和5mL甲醇-水淋洗，棄去全部流出液。2.0Kpa以下減壓抽干5min，最后用10mL甲醇+乙酸乙酯洗脫。將全部洗脫液氮吹干（溫度低于40℃），用適量的甲醇溶解殘渣，過0.45μm濾膜，待測定。

【色譜條件】

色譜柱：C18,  4.6 mm*250 mm，粒度5 μm

檢測波長：350nm

檢測溫度：室溫

流    速：1mL/min

流 動 相:  A：乙腈    B：0.01moL/L草酸水溶液；梯度洗脫；

【譜圖】

1-MINO, 2-ETC, 3-OTC, 4-TC, 5-DMCTC, 6-MCTC, 7-CTC, 8-MTC, 9-DC, 10-EATC, 11-ATC

【儀器配置】