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食品中防腐劑和甜味劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案 

食品加工工藝和防腐的需要,以及為了改善食品品質和色、味、香,在食品生產加工過程中,食品中通常會加入少量的天然或者化學合成的物質。最近幾年,由于食品安全問題層出不窮,人們越來越重視食品添加劑所帶來的安全隱患。

賽智科技參考國標(GB/T 23495-2009),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經實踐檢測可提供苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于食品中苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的測定,僅供廣大用戶參考。

以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細檢測方法。

1  儀器與試劑

1.1  儀器
  LC-10Tvp高效液相色譜儀
  Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
  超聲波水浴振蕩器;
  食品粉碎機;
  pH計;
  天平:分度值為0.001 mg

1.2 試劑
  甲醇:色譜純。
  乙酸銨溶液:稱取1.54 g乙酸銨,加水溶解并稀釋至1000 mL,經0.45μm微孔濾膜過濾。
  亞鐵氰化鉀溶液:稱取106 g亞鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6?3H2O]加水至1000 mL
  乙酸鋅溶液:稱取220g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2?2H20]溶于少量水中,加入30mL冰乙酸,加水稀釋至l000mL
  氨水(1+1):氨水與水等體積混合。

2  色譜條件

色譜柱:Vertex C18柱,250mm x 4.6 mm5μm
  流動相:甲醇+0.02mol/l乙酸銨溶液(5:95);
  流速:1 mLmin
  進樣量:20μL
  檢測波長230nm。

3  試樣溶液的制備

3.1 含脂肪、蛋白的樣品
  稱取約10g左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約60ml蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10分鐘,然后用轉移到100ml比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯;
  加入5ml亞鐵氰化鉀溶液,搖勻,再加入5 mL乙酸鋅溶液,搖勻;
  根據PH計讀數,用氨水調節PH至接近中性;
  用水定容至100ml刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾;
  吸取濾液約1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

3.2 不含脂肪、蛋白的樣品
  稱取約10g左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約60ml蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10分鐘,然后轉移到100ml比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯;
  根據PH計讀數,用氨水調節PH至接近中性;
  用水定容至100ml刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾;
  吸取濾液約1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

 blob.png

注:1-安賽蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精鈉;

                                    混合標準溶液色譜圖
 

4  結果分析
      4.1 儀器精密度的測定
  取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為10.0ug/ml,平行測定7次。

1:精密度的測定結果

8.png

分析結果可以得出,每個組分峰面積的相對標準偏差均小于1%,表明儀器在選定條件下重現性好,完全可以滿足分析測定的要求。

4.2  回收率的測定
分析結果的準確度可以用回收率來衡量?;厥章试浇咏?/span>100%,測得的結果越接近真值,即準確度越好。同時平行測定結果的相對標準偏差可以表明方法的重現性。

取清涼茶、樣品分別進行加標實驗,加入苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度均為10.00ug/ml標準溶液,平行測樣7次,進行回收率實驗。測定結果見表2

 2:清涼茶的加標測定結果和回收率

9.png

從上表可以看出清涼茶的加標測定的回收率:苯甲酸為98.5%-103.4%,山梨酸為98.3%-103.1%,糖精鈉為97.5%-104.3%,安賽蜜為98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近100%,滿足日常檢測的要求。

 


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